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    大鼠(Rat)丙二醛(MDA)ELISA檢測試劑盒樣品收集、處理及保存方法 主營

      面議
    起批量 ≥1 千克
    最小起訂1千克
    供貨總量100千克
    發貨地址上海市金山區
    建議售價¥1600/千克
    更新日期2021年01月20日
    產品規格48T 96T
    VIP4年
    企業認證: 試劑
    注冊資本:300萬元(人民幣)
    企業性質:私營獨資企業
    主營產品:主要產品包括生物試劑,標準品,培養基,elisa試劑盒,多..
    公司地址:上海市金山區漕涇鎮亭衛公路
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    用途范圍: 本試劑盒只能用于科學研究,不得用于醫學診斷
    產地: 上海
    品牌: 赫澎生物
    規格: 48T 96T
    樣本: 血清 血漿 細胞上清液 組織勻漿
    檢測方法: 雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗
    是否進口:

    本試劑盒只能用于科學研究,不得用于醫學診斷

    大鼠(Rat丙二醛(MDA)ELISA檢測試劑盒

    使用說明書

    檢測原理

    試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被丙二醛(MDA)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的丙二醛(MDA)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

    樣品收集、處理及保存方法

    1.  血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

    2.  血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。

    3.  細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

    4.  組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。

    5.  保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

    自備物品

    1. 酶標儀(450nm)

    2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

    3. 37℃恒溫箱

    操作注意事項

    1.  試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正?,F象,水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。

    2.  實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。

    3.  濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時樣本已經稀釋5倍,最終結果乘以5才是樣本實際濃度。

    4.  嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

    5.  所有液體組分使用前充分搖勻。

    試劑盒組成

    名稱

    96孔配置

    48孔配置

    備注

    微孔酶標板

    12孔×8條

    12孔×4條

    標準品

    0.3mL*6管

    0.3mL*6管

    樣本稀釋液

    6mL

    3mL

    檢測抗體-HRP

    10mL

    5mL

    20×洗滌緩沖液

    25mL

    15mL

    按說明書進行稀釋

    底物A

    6mL

    3mL

    底物B

    6mL

    3mL

    終止液

    6mL

    3mL

    封板膜

    2張

    2張

    說明書

    1份

    1份

    自封袋

    1個

    1個

    注:標準品(S0-S5)濃度依次為:0、0.3、0.6、1.2、2.4、4.8 nmol/mL

    試劑的準備

     20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。

    洗板方法

    1.  手工洗板:甩盡孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。

    2.  自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。

    操作步驟

    1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

    2.  設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

    3.  樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。

    4.  除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

    5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

    6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

    7.  每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

    結果判斷

     繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。

     

    試劑盒性能

    1.  準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值,大于等于0.9900。

    2.  靈敏度:*檢測濃度小于0.1 nmol/mL。

    3.  特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

    4.  重復性:板內、板間變異系數均小于15%。

    5.  貯藏:2-8℃,避光防潮保存。

    6.  有效期:6個月

    免責聲明

    1.   試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或體實驗,否則所產生的一切后果,由實驗者承擔,本公司概不負責。

    2.   嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔。


    公司簡介

    歡迎來到赫澎(上海)生物科技有限公司公司網站,讓我們從這里走進科研世界。赫澎生物是一家專注生物制劑,精細化工,基因科學等產品研發銷售的科技生物企業。 赫澎(上海)生物科技有限公司自主品牌“赫澎”,主要產品包括生物試劑,標準品,培養基,elisa試劑盒,多肽合成,儀器儀表等3萬+產品。品種齊全,品質優良。自上市以來,得到廣大用戶的支持和認可。公司初衷就定位于為科研工作者提供優質服務的理念。以科技創新打造“赫澎”,以誠信優質回報客戶。 赫澎(上海)生物科技有限公司促使客戶和效益共贏。 赫澎生物期待攜手全國經銷商,合作共贏。為祖國科研事業增磚添瓦。

    成立時間: 2016-07-18 企業經濟性質: 私營獨資企業 年營業額: 250萬-500萬
    注冊資金: 300萬元(人民幣) 經營模式: 生產商, 員工人數: 11-50
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In order to measure the concentration of BNPin the sample, this BNPELISA Kit includes a set of calibration standards. The calibration standards are assayed at the same time as the samples and allow the operator to produce a standard curve of Optical Density versus BNPconcentration. The concentration of BNPin the samples is then determined by comparing the O.D. of the samples to the standard curve.Samplecollection and storagesSerum- Use a serum separator tube and allow samples to clot for 30 minutes before centrifugation for 10 minutes at approximately 3000×g. Remove serum and assay immediately or aliquot and store samples at -20℃ or -80℃.Avoid repeated freeze-thaw cyclesPlasma- Collect plasma using EDTA or heparin as an anticoagulant. Centrifuge samples for 30minutes at 3000×g at 2-8℃ within 30 minutes of collection. Store samples at -20℃or -80℃. Avoid repeated freeze-thaw cycles.Cell culture supernates and other biological fluids-Remove particulates by centrifugation and assay immediately or aliquot and store samples at -20℃or -80℃. Avoid repeated freeze-thaw cycles.Note: The samples shoule be centrifugated dequately and no hemolysis or granule was allowed.Materials required but not supplied1. Standard microplate reader(450nm)2. Precision pipettes and Disposable pipette tips.3. 37 ℃ incubatorPrecautions1. Donotsubstitutereagentsfromone kitto another.Standard, conjugateandmicroplates are matchedfor optimal performance.Useonly thereagentssuppliedby manufacturer.2. Donotremovemicroplatefromthe storage baguntilneeded.Unusedstripsshouldbe stored at2-8°Cin their pouchwiththe desiccantprovided.3. Mix all reagents before using.Remove allkitreagentsfromrefrigerator and allowthemto reachroomtemperature( 20-25°C)Materials suppliedName96determinations48determinationsMicroelisa stripplate12*8strips12*4stripsStandard0.3ml*6tubes0.3ml*6tubesSample Diluent6.0ml3.0mlHRP-Conjugate reagent10.0ml5.0ml20X Wash solution25ml15mlChromogen Solution A6.0ml3.0mlChromogen Solution B6.0ml3.0mlStop Solution6.0ml3.0mlClosure plate membrane22User manual11Sealed bags11Note: Standard (S0→ S5) concentration was followed by:0,50,100,200,400,800 pg/mlReagent preparation20×wash solution:Dilute with Distilled or deionized water1:20.Assay procedure1. Prepare allreagentsbeforestartingassayprocedure.ItisrecommendedthatallStandardsand Samplesbe addedin duplicateto the MicroelisaStripplate.2. Add standard: Set Standard wells, testing sample wells. Add standard 50μl to standard well.3. Add Sample: Add testing sample10μl then add Sample Diluent 40μl to testing sample well; Blank welldoesn’t add anyting.4. Add100μlofHRP-conjugate reagentto each well,cover with anadhesive stripandincubatefor60 minutesat37°C.5. Aspirate each well and wash, repeating the process fourtimes for a total of five washes.Wash by filling each well with Wash Solution(400μl) using a squirt bottle, manifolddispenseror autowasher. Complete removal of liquid at each step is essential to good performance. After the last wash, remove any remaining Wash Solutionby aspirating ordecanting. Invert the plate and blot it against clean paper towels.6. Add chromogen solution A 50μl and chromogen solution B 50μl to each well.Gently mix and incubate for 15 minutes at 37°C. Protect from light.7. Add 50μl Stop Solution to each well. The color in the wells should change from blue toyellow. If the color in the wells is green or the color change does not appear uniform,gently tap the plate to ensure thorough mixing.8. ReadtheOpticalDensity(O.D.)at450nmusinga microtiterplatereaderwithin15minutes.Calculation of results1.This standard curve is used to determine the amount in an unknown sample. The standard curve is generated by plotting the average O.D. (450 nm) obtained for each of the six standard concentrations on the vertical (Y) axis versus the corresponding concentration on the horizontal (X) axis. 2.First, calculate the mean O.D. value for each standard and sample. All O.D. values, are subtracted by the mean value of the zero standard before result interpretation. Construct the standard curve using graph paper or statistical software. 3.To determine the amount in each sample, first locate the O.D. value on the Y-axis and extend a horizontal line to the standard curve. At the point of intersection, draw a vertical line to the X-axis and read the corresponding concentration. 4.Any variation in operator, pipetting and washing technique, incubation time or temperature, and kit age can cause variation in result. Each user should obtain their own standard curve.5.The sensitivity by this assay is1.0 pg/ml6.Standard curveStorage: 2-8℃.validity: six months.FOR RESEARCH USE ONLY; NOT FOR THERAPEUTIC OR DIAGNOSTIC APPLICATIONS!PLEASE READ THROUGH ENTIRE PROCEDURE BEFORE BEGINNING! 查看詳細∨
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